明膠酶譜試劑盒出條帶的小技巧
更新時(shí)間:2024-11-13 點(diǎn)擊次數(shù):26次明膠酶譜試劑盒出條帶的小技巧
很多老師在購(gòu)買(mǎi)了我們明膠酶譜試劑盒之后,不知道應(yīng)該如何操作,才能很快做出條帶,信帆生物技術(shù)給您答疑解惑。
實(shí)驗(yàn)中的小貼士告訴大家:
1.做酶譜要測(cè)定樣品蛋白的濃度(同Western blot,建議用BCA法);
2.酶譜法是測(cè)定樣品中MMP-2、9活性的,如果煮沸使蛋白變性就沒(méi)有用了,故禁忌煮沸;
3.上樣緩沖液中也不能加β-巰基乙醇,這點(diǎn)由western blot轉(zhuǎn)作明膠酶譜的朋友切記、切記;
4.蛋白上樣量必須保證一樣,不會(huì)出現(xiàn)一致的透明條帶,如果不能保證上樣量一致,測(cè)出的相對(duì)活性也沒(méi)有統(tǒng)計(jì)分析的意義;
5.上樣時(shí)非常重要的一點(diǎn),必須在4℃環(huán)境中操作,一般用的是冰臺(tái),同時(shí)所用的蛋白樣品(-80℃冰箱)不能是以前曾解凍使用過(guò)的,必須是新取出的,因?yàn)橹灰鈨鼍蜁?huì)有部分酶降解,影響你的結(jié)果。此外做過(guò)一次酶譜的蛋白樣品也不要反復(fù)使用,下次應(yīng)使用其它已分裝、未解凍過(guò)的樣品;
6.電泳后的步驟很簡(jiǎn)單,液體別配錯(cuò),照著方法做就可以了。
如果你曾做過(guò)Western blot,在這里恭喜你了,只要注意幾個(gè)小細(xì)節(jié),明膠酶譜對(duì)您非常簡(jiǎn)單。
另外上海信帆生物科技有限公司提供各類(lèi)實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù),包括WB實(shí)驗(yàn)代測(cè),免疫組化實(shí)驗(yàn)代測(cè),放免實(shí)驗(yàn)代測(cè),生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)等到,上海和南京地區(qū)的客戶(hù)可以提供免費(fèi)上門(mén)取樣服務(wù)。其他地區(qū)的客戶(hù),樣本用泡沫箱子包好,放干冰或者冰袋寄送給我們。代測(cè)時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容而定,通常為5到15個(gè)工作.提供原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù), 實(shí)驗(yàn)操作步驟以及實(shí)驗(yàn)所用儀器。
明膠酶譜試劑盒如何操作才會(huì)出結(jié)果